首先，将所有条带的IntDen都减去图片背景的IntDen，以扣除背景影响；然后用目标蛋白的灰度值除以其对应泳道的内参照条带灰度值，以此作为该组的目标蛋白相对表达量A。标准化方法1：如果你是用一张膜来统计，那么直接用所有组...

1.图片来源。DAB显色的免疫组化图片2.输出的结果。3.光密度（OD）反映蛋白的量。灰度值：黑0---白255。步骤1.光密度校正。具体步骤很容易查到。2.设置测量参数。area和IOD面积过滤值=100显示选项中： ...

也可以直接在Results对话框中，选择File→Saveas，直接导出excel表格。在excel表格中将目的蛋白的灰度值除以内参蛋白的灰度值，进行归一化处理。

4、在Count/Size界面中点击CountJ键，软件就会自动对条带进行灰度计算。5、在Count/Size界面中点击View中的MeasurementData，查看统计结果。

因为内参的浓度是已知且单一条带的蛋白样品。通过待测样品盒内参样品灰度值做对比可以算出待测样品大概的浓度。个人意见，仅供参考，因为一般检测蛋白含量的做法都是通过BF，BCA，Lowry之类的检测方法来测的。

灰度是就是代表目的蛋白量的多少。目的蛋白表达得越多,一抗使它固定下来得就越多,二抗显色后灰度值就越高。

点第一行后按住shift键，点最后一行进行全选数据，导出数据6、在Excel表格中计算目的蛋白和内参蛋白的平均灰度值，用平均目的蛋白除以平均内参蛋白；得到多组比值后，用GraphPad绘制柱状图（其他软件也可以）7、GraphPad绘制柱状图...

选择50基本可以。4、设置定量参数量Analyze>SetMeasurements,点击面积area，平均密度meangrayvalue，和灰度值IntegratedDensity。5、设置定量单位Analyze>SetScale,在Unitoflength”边的方框里输入"pixels"像素。6、当测定完所有条带...

如果样品量充分，可以先检测内参，观测样品间内参显色条带是否一致，根据差异大小调整各样品的上样量重新进行WesternBlotting实验，至内参量一致为止；若内参一致，即可进行不同样品间目的蛋白表达变化分析。这样虽然麻烦一点，...

实际上可选择ARGB模型中任一通道作为叠加灰度值,从而对于有缓冲区交叉的区域,可叠加灰度值,因而缓冲区交叉的越多,灰度值越大,这块区域越“热”。最后,用叠加后的灰度值为索引,从一条有256色的色带中映射颜色,并对颜色重新...