这简单,恒流,电压最大,电流250V,时间90min,我跑的是130kDa
分子量越大,转膜时间越长。60KD转膜可以用300毫安。恒流100min,20KD需要一个小时。
300mA90分钟,我们是1.0的胶厚度,要是0.75也行,但1.5mm的厚胶要时间长一些,另外你做的蛋白如果超过100kd建议时间更长一些,若是小蛋白就减少转模时间,立春红确定最适时间
10%的胶即可,半干转我一般习惯用300mA,50-120min.可以先转100min试试;如果38的表达量不高,尽量不要超过50min.时间充足的话,这两个蛋白可以分开转。发光时间一般3-5min
湿转是吧?转膜的时候会有最高电流,一般是在400mA如果转膜缓冲液重复次数太多,会导致其电流过大,不好转膜一般情况下,你把电压调节到80V时不超过200mA是可以用的。
westernblot湿转时,一般是用恒压,当然恒流也可以,根据蛋白大小,正常的条件是80V,120分钟,如果分子量较小,可以恒流200mA,120分钟。具体使用条件可以根据westernblot湿转效果再做调整。蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即...
我做过18KD的用的是pvdf膜转膜200mA45min
泡胶是电路是电泳槽小槽里的溶液,离子会经过胶渐渐进去下层,电路中离子减少,电阻增大,恒压的话就会电流降低。转膜时离子一直在,可能是温度的问题吧
100kda转膜2小时以上。根据中国生物信息网资料显示转膜电流大小一般分子量大于100kda可用200ma恒流转膜100min按一个转膜槽计算,分子量小于100kda宜减小电流,可用160-180ma转膜90min分离的蛋白分子量小于100kda的选择转膜时间为...
一般浓缩胶为80V,这样可以达到较好的浓缩效果,当条带达到分离胶时,可以调到220V,这样时间快点,做Wb时蛋白降解较少。转膜时一般为100V,转膜时间要根据蛋白大小确定,130kD蛋白分子较大,最好时间长点,不过太长也不好...