过夜转膜的时间与电流设置为30到60分钟，200到40毫安。根据查询相关资料显示，对于湿转法，过夜转膜的电流在200毫安到400毫安之间，转膜时间为30到60分钟。也可以在15到20毫安转膜过夜。大片段的大于50KD的可以选用350毫安，...

对于湿转法：一般转膜的电流在200mA-400mA之间，转膜时间为30-60分钟。也可以在15-20mA电流中转膜过夜。大片段的>50KD的可以选用350mA电流，小片段的可以用250mA。具体的转膜时间要根据目的蛋白的大小而定，目的...

2，转膜湿转，200mA,100分钟。3,5%nofatmilkTBS室温封闭2小时。4，一抗4度过夜，二抗室温2小时。GAPDH的转膜时间可以为60分钟。一般来说，蛋白质的分子量需在8000以上。若分子量再小一些就属于多肽的范围了。

100kda转膜2小时以上。根据中国生物信息网资料显示转膜电流大小一般分子量大于100kda可用200ma恒流转膜100min按一个转膜槽计算，分子量小于100kda宜减小电流，可用160-180ma转膜90min分离的蛋白分子量小于100kda的选择转膜时间为1...

转膜的条件是恒流300mA转60分钟。使用转膜设备（湿转Bio-Rad）在恒流300mA转60分钟即可，该条件不止用于13kd的蛋白转膜，相同条件也可用于数个30-70KDa的蛋白，都能成功转上。蛋白又名鸡子白，异名鸡卵白（《别录》）、...

westernblot湿转时，一般是用恒压，当然恒流也可以，根据蛋白大小，正常的条件是80V，120分钟，如果分子量较小，可以恒流200mA，120分钟。具体使用条件可以根据westernblot湿转效果再做调整。蛋白质印迹法（免疫印迹试验）即...

60到90分钟。nc膜转膜时间是很长的，大约为60到90分钟。转膜是把DNA从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物（一般是尼龙膜）上固定，是进行各种后续研究（如RFLP分析，阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究）的前提。

100kda转膜2小时以上。转膜电流大小一般分子量大于100kda可用200ma恒流转膜100min(按一个转膜槽计算)，分子量小于100kda宜减小电流，可用160-180ma转膜90min分离的蛋白分子量小于100kda的选择转膜时间为120min分子量大于100kda...

没有加SDS。用的是PVDF膜，甲醇活化一般只用半分钟到一分钟，就放入去离子水中泡着待用了。转膜时，是恒流300mA，基本就转1.5-2h。一般没问题的呀。我觉得你检查一下你的转膜缓冲液（我一般不重复用），还有就是铺膜...

300mA90分钟,我们是1.0的胶厚度,要是0.75也行,但1.5mm的厚胶要时间长一些,另外你做的蛋白如果超过100kd建议时间更长一些,若是小蛋白就减少转模时间,立春红确定最适时间