这与你的仪器方法有关，假设你的流速是300uL/min,总方法时间是15min,那么你每针样品总共消耗的流动相体积就是V=300μL*15=4.5ml;由于一般都有A,B两个流动相，这里算出的体积是每针样品所有流动相使用的总体积。

大部分的液相都是反相色谱柱（如C18，即十八烷基硅胶键合柱），大部分的反相色谱流动相都是水-甲醇或者乙腈-甲醇。有些物质易溶于水，有些物质易溶于甲醇和乙腈。比例要看物质的溶解程度，如，物质A用水-甲醇（90：10）...

配的量是根据你的需要来定的，比如你打算做10个样，每个样30分钟，流速是1ml/分钟，那么你需要大约400~500ml流动相，如果不含水，可以保存久一些，含水的流动相最好现配现用

这样计算的话（1ml/min的流速），一个样品大概需要10-20ml的流动相，另外色谱柱的平衡也需要消耗流动相。

设置A-B（50:50），流速是1.0ml/min，两个通道接乙腈水冲洗40min，然后两个通道接乙腈冲洗40min。里面的盐应该挺多的，所以一定要冲干净。尤其是A通道，因为全部都是缓冲盐，如果不冲洗的话很容易长微生物。

高效液相色谱仪（HPLC）中流动相的选择涉及到多种因素，甲醇与水80:20的比例是一种常见的流动相组成，被广泛用于很多分析方法。这种比例的选择主要基于以下几个原因：溶解性能和极性调节：溶解性能：甲醇和水的混合物具有较好...

1、A相可以用PH=3.0的缓冲液（0.01-0.03m的磷酸二氢铵或钾）2、B相甲醇与乙腈均可.3、A与B的比例,可以根据实际分离情况,进行调整（增大或减小）,可先试一下1：1,分不好就降低,出峰太晚就增加（幅度10%）

A样：对照品的质量C对：对照品的含量V：样品的稀释倍数A对：对照品的稀释倍数M样：对照品的峰面积含量计算公式：很多药物都是含水化合物，液相检测出来的就是它本生物质的峰面积，计算出来的含量是含水时的含量，...

2.高速：流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于1h。3.高效：近来研究出许多新型固定相，使分离效率大大提高。4.高灵敏度：...

最高浓度一般是以测定限度浓度的120%~200%来验证，比如含量测定时样品浓度确定为1mg/ml，则最高浓度可验证到1.2mg/ml；再比如有关物质测定杂质A对照溶液浓度为1μg/ml，则最高浓度可验证到2μg/ml。液相色谱进样最高...