灰度是就是代表目的蛋白量的多少。目的蛋白表达得越多,一抗使它固定下来得就越多,二抗显色后灰度值就越高。
这种判断是存在误差的,这时候就需要对结果条带的灰度值进行计算并做统计分析——目的蛋白的灰度值除以内参的灰度值,以校正误差,所得结果代表某样品的目的蛋白相对含量,
首先要分析的就是有无目的蛋白的条带,有无条带就是一个定性的结果,这种分析是比较简单。当然这其中还要综合考虑内参等对照样品。然后就是有条带之后,各个条带灰度值的分析,而对其灰度值的量化不外乎是在肉眼可见的基础...
wb灰度值归一化处理,是为了消除其他变换函数对图像变换的影响。在excel表格中将目的蛋白的灰度值除以内参蛋白的灰度值,即可进行归一化处理。
All”,然后复制数据“IntDen”到Excel表即可进行分析。也可以直接在Results对话框中,选择File→Saveas,直接导出excel表格在excel表格中将目的蛋白的灰度值除以内参蛋白的灰度值,进行归一化处GraphpadPrism软件中作柱状图。
首先,将所有条带的IntDen都减去图片背景的IntDen,以扣除背景影响;然后用目标蛋白的灰度值除以其对应泳道的内参照条带灰度值,以此作为该组的目标蛋白相对表达量A。标准化方法1:如果你是用一张膜来统计,那么直接用所有组...
如果样品量充分,可以先检测内参,观测样品间内参显色条带是否一致,根据差异大小调整各样品的上样量重新进行WesternBlotting实验,至内参量一致为止;若内参一致,即可进行不同样品间目的蛋白表达变化分析。这样虽然麻烦一点,...
1如果用传统胶片做载体来显影,你的条带就是蓝色背景上更深的黑色,这时条带越黑反映蛋白量越大,相对灰度也越大,反之亦然.即相对灰度与蛋白量成正比.2如果用凝胶成像仪成像,条带是正片还是反转片是可以选择的,如果你把...
30是指内参上样量是30微克的情况下,具体上多少就是多少。灰度值差异很大,所以不能直接用来分析。要分析就是用比值分析。用比值来分析比较下实验组和对照组就可以避免出现绝对灰度值。
题主是否想询问“上样量增加后内参变小了怎么办”?1、首先调整上样量,如果还是调不齐,建议做灰度扫描。2、其次将目的蛋白的灰度值比上对应的内参。3、最后按照内参压出来的浓度来调整上样量就行了。