根据自己细胞生长的程度，虽然一般讲究2~3天换下液，不过这个跟你的培养液有很大的关系，某些培养液适合这种细胞生长的话，换液时间就短，反之则长。

2.5用D-Hanks液20-30ml/min快速灌注清除肝内血液，1分钟内即可见肝脏颜色变浅，持续灌注10分钟至肝脏呈米黄色。同时切开胸腔结扎肝上下腔静脉。2.6插另一硅胶管入肝下下腔静脉并结扎固定，换D-Hanks液为胶原酶消化液(...

细胞培养1一原代培养（略）2二.传代培养准备及注意事项换液传代冻存复苏MTT3准备事项1.紫外灯照射细胞室30分钟,风机运行10分钟后方可进入实验室.2.穿专用的口罩,帽子,拖鞋,工作衣等.3.带手套,并用酒精擦拭之.4.准备好...

4.严格前3天不动培养瓶，可在第五六天首次换液。5.有细胞爬出，贴壁生长后，千万要有耐心，我的第一瓶原代细胞张了整整31天。6.传代后的系膜细胞长得就挺快了，千万别忘了冻存呀。7.用到10代左右，细胞活力就不...

通常就是肝细胞了,要培养好,最好有大于85%以上的活性.原代肝细胞最好生长在鼠尾胶原上,也就是用鼠尾胶原铺板,然后再普细胞.4小时后换液,然后每20小时左右换液,通常原代肝细胞难以增值,但是维持20天左右没问题.

5）、每隔2到3天更换培养液一次或根据培养液颜色的变化确定换液时间。（2）注意事项1)原代培养的分离细胞在初次接触体外环境时，虽然被分散成单个细胞，但它们之间的互相影响还是存在的，而且这种影响对细胞能否存活是非常...

（9）一般说来，若培养液无明显改变，1周换液1次即可。待细胞长满整个培养皿内表面，即可进行传代培养。3.需要说明及注意的问题（1）如果是用培养瓶而不是培养皿，则接种组织块千培养瓶底壁后，要轻轻地...

原代细胞冻存基本技术1、选用原代细胞生长状态好(90-95%)，生长数量大于5×105进行冻存。2、原代细胞冻存24小时，须换液新鲜原代细胞培养液一次。3、贴壁的原代细胞需常规用0.25%胰酶消化，将消化后的细胞悬液收集至...

一般3～5d，原代培养细胞可以黏附于瓶壁，并伸展开始生长，可补加原培养液量1／2的新培养液，继续培养2～3d后换液，一般7～14d可以长满瓶壁，进行传代。4.注意事项（1）无菌操作：细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因...

1.贴壁细胞:对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱.PBS清洗2-3次,去除血清和死细胞,50ml培养瓶加入消化液约0.6ml,按此比例进行消化,(根据配制强度经验),晃动使消化液铺...