1)取100ul新鲜制备的感受态细胞,加入质粒1ulDNA混匀,同时设置对照组(未加质粒,未加受体菌,已知具有转化活性的DNA)。冷冻的感受态细胞要在冰上解冻,待管中最后一点冰融化后,迅即加入DNA.解冻感受态细胞温度高于0℃,会降低转化效率。

7.重复5－8步骤一次8.每100ml初始培养物用2ml用冰预冷的0.1mol/LCaCl2重悬每份细胞沉淀。将重悬物置冰水中，并于此时4℃放置12-24小时（注：5小时后可进行转化，以初步观察感受态的转化率），再加入30%的无菌甘...

一般地,DNA溶液的体积不应超过感受态细胞体积的5%,1ng的cccDNA即可使50ul的感受态细胞达到饱和。对于以质粒为载体的重组分子而言,分子量大的转化效率低,实验证明,大于30kb的重组质粒将很难进行转化。此外,重组DNA分子的构型与转化效率也密切...

不对,通过转化到感受态细菌中,不是细胞.感受态的大肠杆菌,可以自己制作也可以通过购买.之后将细菌凃到含有抗生素的板子上,长出克隆后挑取单克隆,将单克隆加入含有抗生素的细菌培养基中培养,之后提取质粒,提取质粒可以购买相应的...

1、从-70℃冰箱中取200μl感受态细胞悬液,室温下使其解冻,解冻后立即置冰上.2、加入pBS质粒DNA溶液(含量不超过50ng,体积不超过10μl),轻轻摇匀,冰上放置30分钟后.3、42℃水浴中热击90秒或37℃水浴5分钟,热击后...

 实验仪器-70℃冰箱实验步骤从-70℃冰箱中取200μL感受态细胞悬液，室温下使其解冻，解冻后立即置冰上。加入pBS质粒DNA溶液（含量不超过50ng，体积不超过10μL），轻轻摇匀，冰上放置30min。42℃水浴中热击90s或37...

CaCl2法制备感受态的原理感受态细胞的制备质粒的转化转化子的筛选材料及方法菌种：大肠杆菌BL21菌株质粒：pGEX-6P-1感受态制备方法：CaCl2法转化方法：热激法CaCl2制备感受态的原理。细菌处于0·C，CaCl2的低渗溶液...

1、提取DNA基因组或则mRNA（可用试剂盒完成，一般问题都能解决）。2、设计引物，PCR扩增目的片段。3、选择合适质粒载体，进行酶连接，构建亚克隆子（有商品化质粒可供选择）。4、用构建好的质粒转化感受态细胞（方法生物技术...

dna工程，还是高中的知识，所以可能不正确先用dna剪切酶剪短质粒dna，然后把待转dna用dna连接酶连接到断裂处鉴别则用培养基，看是否有转入dna所期望达到的功能

方法一：细菌转化的方法多以Mendel和Higa（1970）的发现为基础，其基本方法是用冰预冷的CaCl2或多种2价阳离子等处理细菌，使之进入感受态得以转化。用CaCl2制备新鲜或冷冻的大肠杆菌感受态细胞，常用于成批制备感受态细菌。本法...