pcr扩增曲线的意义
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请教下大神,实时定量PCR(qpcr)实验,看扩增曲线的意义是什么?

你好,扩增曲线可以粗略地判断扩增效率。SYBRGreen的双deltaCt法要求目的基因和内参的扩增效率基本一致。如果不一致,需要对公式进行修正,部分qPCR仪的配套软件可以做到,直接输入每对引物的扩增效率。但无论如何,保证高扩增...

荧光定量PCR中扩增曲线能说明什么问题

在荧光法定量PCR中溶解曲线直接表示了引物的特异性,如果是单一的峰,那么我们要看的是TM值在哪里,通常情况下都是80---90之间,如果太小那可能扩增出来的不是你想要的片段就是引物二聚体,如果两个峰那就说明出现了非特异性...

pcr增长图怎么看

2.曲线指数期斜率,反应了扩增效率,越大说明扩增效率越高。扩增效率越高,试剂灵敏度表现会越好。3.基线,图上的基线也就是阴性样本的扩增曲线,平直或略微下降是好试剂的表现,阴阳性清楚,不易误判。如果有上扬趋势...

荧光定量PCR中扩增曲线能说明什么问题

即每扩增一条dna链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与pcr产物形成完全同步。

怎么通过Q-PCR的扩增曲线和溶解曲线来分析结果,如何通过曲线来判断结果...

(1)溶解曲线是判断扩增产物是否单一的曲线,顾名思义,其跟模板(或其浓度)没有关系,扩增什么基因就应该有其相对应的溶解曲线;(2)一般SYBR法的目的基因在80~90℃之间;(3)出现其他峰就该考虑是否为引物二聚体(...

qPCR扩增曲线的自述

4.反应体系中可能有PCR反应抑制物:建议将模板梯度稀释后加入反应体系,或者重新制备纯度更高的模板。三.扩增曲线末尾起跳,但没有完整扩增1.可能存在污染:建议对样本进行复检。2.如果是阴性对照,可能是引物二聚体或...

怎么通过Q-PCR的扩增曲线和溶解曲线来分析结果,如何通过曲线来判断结果...

2、溶解曲线:溶解曲线是判断扩增产物是否单一的曲线,顾名思义,其跟模板(或其浓度)没有关系,扩增什么基因就应该有其相对应的溶解曲线,类似于电泳。那么你扩增几种基因就应该有几种对应的峰(一般SYBR法的目的基因在80...

SYBR green PCR溶解曲线有何意义?

\r\nDNA溶解曲线表示扩增产物的特异性。\r\n曲线横坐标是温度,每个温度点一个。一般从60到98度纵坐标是荧光强度的变化值(不是强度本身)。一开始加热的时候,虽然荧光强度比较强,但是由于双链没有解离,所以荧光...

谁能具体解释一下荧光定量PCR中溶解曲线的意思以及作用

荧光定量pcr的溶解曲线理解:用SyberGreen方法做完PCR后,用来判断产物是否相对专一。应结束后,逐渐加温。和SyberGreen分子结合的PCR产物随温度升高逐渐变为单链,就不能在和SyberGreen结合。出现怪异的溶解曲线大部分都是机器...

通过PCR扩增曲线可以判断基因表达量吗?

普通PCR一般只能定性判断基因表达量,但是现在有一种新技术叫做:实时荧光定量PCR这种技术使得通过PCR扩增来定量计算RNA含量成为可能,并且精确度较高。所以,传统曲线只能定性判断,实时荧光定量PCR曲线可以定性判断。