《中国药典》。《中国药典》2010版规定，菌种保藏中心获得的冷冻干燥的菌种为0代，冷冻干燥的原始菌种开启后转种为第1代，直至到第3代为工作菌种，即可应用生产。

继代式菌种是二代菌种。液体菌种反复转接。就容易发生老化或者退化。为了保持菌种的优良品质。所以不能继代培养。把接种好的牛奶放入恒温水浴槽中或者恒温培养箱中，培养温度42度±0.5。培养时间要看菌种的活力多少和菌种的种...

冻存后又复苏应该算是细胞经过了一个休眠期。可以算一代，也可以算是二代。看你定的标准是怎么样的。

美国药典（USP）中规定：“将微生物接种至一新鲜培养基上/内，每萌发一次即称为一代，因此，当原始菌种复溶并转至一培养基内生长，即认为已传代一次，”并规定“菌种的传代次数（自原始菌种冻干粉起）不得超过5代”。...

每支过来的0代安瓿必须经过确认，实验室至少要进行菌落形态和革兰氏染色的实验，有条件的话通过生化或其他方法确认到属种。该实验是确认菌株的纯度、活力和特性，我们是确认复苏后的1代标准储备菌株，即我们保藏的菌株，保证...

2-3代后。根据丁香园论坛显示，复苏的细胞一般要传代2-3代后才能用于实验。细胞复苏是将冻存的细胞进行复活的过程，在细胞复苏后，需要经过2-3代的传代培养，待细胞状态稳定后再进行相关实验。

2至3代。根据查询中国教育科研网官网显示，复苏的细胞要传代2至3代后才能用于实验。细胞复苏是指将冻存在液氮里边或者负80度冰箱中的细胞解冻，再培养传代。细胞复苏应采用快速融化的方法，这样的目的是为了让细胞外结晶在很...

一般接种时按照1:50~1:200都可以。个别时候如果想快速收集菌体可以采取更大的接菌浓度，不过，一般不会超过1:25，否则过多的旧培养基会影响生长；我试过最低1:10000接种，除了需要更长的培养时间没什么别的问题。

像是传代一样，比如说你冻存的时候，细胞长满了，或者成团了，是P8代，再传一代就是P9了，冻存只是在传代的时候冻了一下，拿出来复苏就等于传了一代，所以复苏后是P9

菌株不同保藏方法也不尽相同，应根据文献资料选择最佳保藏方法。对于从标准菌种冷藏中心或经ISO9000质量管理体系认证或其它有效的认证的商业机构获得原包装的质控菌株，复苏和使用应按照制造商提供的使用说明进行。